Efectes de la reperfusió després de la isquèmia cerebralproteïnes d'estrès cel·lular, estrès oxidatiu i activació del complement

Resumen

lobalmente, esta tesis muestra diferentes fenómenos que se asocian a la reperfusión después de isquemia cerebral. Por un lado, la inducción de la proteina HSP-70, a la que se atribuyen propiedades antiapoptóticas y protectoras, promoviendo la supervivencia neuronal en la zona de la penumbra. La generación de animales transgénicos que expresan una proteína fluorescente bajo el promotor del gen HSP-70 nos ha permitido visualizar en animales vivos la zona de la penumbra utilizando técnicas de microscopía confocal intravital, así como monitorizar esta expressión en regiones cerebrales utilizando tecnología FRI. A pesar de la inducción de moléculas protectoras que facilitaran la supervivencia neuronal en la zona de la penumbra, la reperfusión también conlleva daño secundario que se asocia principalmente a estrés oxidativo e inflamación. Este daño por reperfusión no se observa en todos los animales sinó aproximadamente en la mitad de ellos que han estado sometidos a la isquemia transitoria seguida de reperfusión. Hemos encontrado que la hiperemia reactiva en el momento de la reperfusión es un biomarcador de daño por reperfusión. El subgrupo de animales con hiperemia reactiva es el que es suceptible de responder a tratamientos anitoxidantes, como hemos demostrado con el análogo sintético de la vitamina E, CR-6. La administración oral de CR-6 dos horas después del inicio de la isquemia, protege los animales hiperémicos disminuyendo el volumen de infarto cerebral y atenua los déficits neurológicos. Esta protección esta relacionada con una disminución del estrés oxidativo a nivel de la vasculatura cerebral, menor alteración en la permeabilidad de la barrera hematoencefálica, menor infiltración leucocitaria y menor imflamación. La isquemia/repefusión tambien activa el complemento. Hemos demostrado que la vía de las lectinas está implicada en la lesión cerebral dado que los animales deficientes en la proteina MBL de esta vía tienen lesiones de menor tamaño y presentan menos alteraciones neurológicas. Hemos demostrado que los efectos perjudiciales de la MBL son debidos a la disminución del flujo sanguíneo cerebral durante las horas siguientes a la reperfusión post-isquemia. Esta dismunición está relacionada con el depósito de fibrina/fibrinógeno en la vasculatura cerebral de la zona afectada y con la activación de la trombina, tal como demuestran los efectos beneficiosos del inhibidor de trombina Argatroban, que se observan en los animales que tienen MBL pero no en los animales deficientes. Los resultados de este trabajo permiten concluir que diferentes estrategias para minimizar el daño por reperfusión podrían incluir la inducción de la expresión de HSP70 para favorecer la supervivencia de las neuronas de la penumbra, y la inhibición del estrés oxidativo así como la activación del complemento por la vía de las lectinas para evitar la trombosis secundaria durante la reperfusión, atenuar el estrés oxidativo en el endotelio vascular y prevenir la ruptura de la barrera hematoencefálica y la inflamación tisular.