Glycoengineering of extracellular vesicles

Resumen

Las vesículas extracelulares (EVs) han surgido como potentes conductores de la comunicación intercelular. Estas nanovesículas lipídicas son secretadas por las células y transportan cargas biomoleculares funcionales de proteínas, ácidos nucleicos, lípidos y metabolitos a las células receptoras. Hay enormes esfuerzos para reutilizar los EVs con fines terapéuticos. Los EVs pueden cargarse con una carga exógena para la administración selectiva de medicamentos y, en el caso de los EV derivados de células madre mesenquimales, tienen suficientes propiedades regenerativas para ser utilizados directamente sin ingeniería adicional. Recientemente ha habido un aumento de la apreciación del papel de los glicanos EV en los procesos de captación y tráfico dentro del cuerpo. En esta tesis nos proponemos explorar más a fondo cómo la cambiante glicosilación EV altera su captación por las células receptoras, con el objetivo final de tomar nuestros modelos EV de glicoingeniería in vivo para demostrar que la glicoingeniería podría utilizarse para mejorar los productos EV terapéuticos. La clave de nuestro enfoque ha sido el uso de microarreglos de lectinas para ensayar la glicosilación EV y verificar el éxito de nuestros enfoques de ingeniería. Para ello, empleamos tres métodos principales de glicotécnica: enzimas de glicosidasa para alterar los glicanos de superficie de los EVs; pequeños inhibidores moleculares de las enzimas de la vía de glicosilación para tratar las células durante el cultivo; la funcionalización de EVs con estructuras de glicodendro con la química del clic.