Desarrollo y aplicación de técnicas de diagnóstico serológico y molecular para el estudio de la transmisión calostral y horizontal del virus maedi-visna (vmv) en ovino

Resumen

En esta tesis se investigan aspectos del diagnóstico, epidemiología y control de la infección por el VMV en ovino. Se realizaron estudios para (i) comparar la validez diagnóstica de hasta siete ensayos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de VMV integrado en células (provirus) y libre, (ii) investigar la presencia de VMV en calostro de ovejas seropositivas y su relación con la infección en corderos y (iii) estudiar la transmisión horizontal del VMV en ovino adulto sometido a distintos grados de presión de infección de VMV. Parte del estudio comparativo de las PCRs se llevó a cabo en el seno de un proyecto del V Programa Marco de la Dirección General de Investigación de la Comisión Europea dirigido a la elaboración de un ensayo de PCR para la detección de LVPR de espectro paneuropeo. Se realizó un análisis de sensibilidad y especificidad diagnóstica con cinco ensayos de los laboratorios de lentivirus ovinos de las Universidades de Lyon (Francia), Utrecht (Holanda), Oslo (Noruega), en el Instituto de Agrobiotecnología y Recursos Naturales, CSIC-UPNA de Pamplona y en el Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agrario (NEIKER) de Derio. Con todos los ensayos fue posible detectar LVPR de origen ovino y caprino y en general la especificidad de las técnicas fue buena. Sin embargo, la sensibilidad de los ensayos varió considerablemente dependiendo del ensayo, el origen de las muestras y el laboratorio donde se realizó el ensayo. Globalmente, la PCR desarrollada en Derio para amplificar secuencias de la región "long terminal repeats" (LTR) mostró una sensibilidad comparativamente más alta que el resto de PCRs en ADN de muestras de sangre de ovinos de Europa. Para investigar la infección por VMV asociada al consumo de calostro se analizó la presencia de anticuerpos frente a VMV y de VMV integrado y libre en calostro de ovejas seropositivas y la seropositividad a los 300 días de edad en corderos que consumieron