Purificación y caracterización espectroscópica del centro de reacción del fotosistema II de cianobacterias

Resumen

A PARTIR DEL COMPLEJO OEC DE LA CIANOBACTERIA TERMOFILA P. LAMINOSUM SE HA OBTENIDO UNA PREPARACION DEL CENTRO DE REACCION DEL FOTOSISTEMA II DE GRAN CALIDAD, QUE CONTRASTA CON LAS DESCRITAS POR OTROS AUTORES EN CUANTO A ACTIVIDAD, CONTENIDO EN POLIPEPTIDOS Y COMPOSICION DE PIGMENTOS. EN BASE A TODOS ESTOS PARAMETROS SE PUEDE AFIRMAR QUE LA PREPARACION DESCRITA EN ESTE TRABAJO ES CON DIFERENCIA LA MEJOR PREPARACION OBTENIDA HASTA EL MOMENTO A PARTIR DE UNA CIANOBACTERIA. LA ACTIVIDAD DE ESTE CENTRO DE REACCION ES APROXIMADAMENTE UN 25% MAS ACTIVO QUE EL AISLADO DE PLANTAS SUPERIORES. EL PROCESO DE SEPARACION DE CARGAS PARECE TENER LUGAR EN EL ORDEN DE ALGUNOS PICOSEGUNDOS, TAL COMO SE DESPRENDE DE LOS TIEMPOS DE VIDA DE LAS CINETICAS DE FLUORESCENCIA. LAS CARACTERISTICAS ESPECTROSCOPICAS DEL CENTRO DE REACCION OBTENIDO DE P. LAMINOSUM SON EN GENERAL PARECIDOS A LAS QUE SE PRESENTAN EN EL CENTRO DE REACCION DE PLANTAS SUPERIORES. LOS METODOS DESARROLLADOS PARA P. LAMINOSUM HAN SIDO APLICADOS CON BASTANTE EXITO A OTRA CIANOBACTERIA, SYNECHOCYSTIS, QUE ES MUY INTERESANTE PARA ESTUDIOS DE BIOLOGIA MOLECULAR. SIGUIENDO LOS METODOS DESCRITOS SE PODRA AISLAR EL CENTRO DE REACCION DEL FOTOSISTEMA II DE MUTANTES OBTENIDOS POR BIOLOGIA MOLECULAR CON POTENCIAL INTERES EN ESTUDIOS DEL FOTOSISTEMA II. UTILIZANDO LOS COMPLEJOS OEC Y DE CENTRO DE REACCION HEMOS SIDO CAPACES DE OBTENER POR PRIMERA VEZ ESPECTROS DE RESONANCIA RAMAN EXCITANDO EN LA TRANSICION QY DE LOS PIGMENTOS DENTRO DE LOS COMPLEJOS. EN EL CASO DEL CENTRO DE REACCION NO SOLO SE OBSERVARON LAS BANDAS DE LA CHL A SINO QUE TAMBIEN FUERON EVIDENTES LAS DE PHEO A. LA UTILIZACION DE SUPERFICIES METALICAS ACTIVAS EN SERRS PERMITIERON REDUCIR CONSIDERABLEMENTE EL RENDIMIENTO DE LA FLUORESCENCIA Y ASI OBTENER ESPECTROS VIBRACIONALES DE LOS PIGMENTOS UNIDOS A PROTEINAS. ESTOS RESULTADOS ABREN LAS PUERTAS A FUTUROS ESTUDIOS SOBRE LOS ESTADOS VIBRACIONALES QUE ACOMPAÑAN A LA TRANSICI