Generación de mediadores lipídicos inducida por tert-butilhidroperóxido en hepatocitos de rata

Abstract

El estrés oxidativo causa alteraciones en el metabolismo el acido araquidonico (AA) en distintos tipos celulares. Distintos estudios atribuyen a los especies oxigenadas reactivas y/o a la peroxidacion lipidica inducida por el oxidante un importante papel en la liberacion de AA de los fosfolipidos de la membrana. Varias vias metabolicas pueden contribuir a dicha liberacion de AA en las celulas. La principal via implica a la fosfolipasa A2, tanto citosólica como de secreción que actúa extracelularmente. Otras vias implican a los fosfolipasas C y D que actuan cordinadamente con la DAG lipasa y fofatidato fosohidrolasa, respectivamente. Los mecanismos que conducen a la activacion de estos enzimas estan fuertemente regulados debido a que los metabolitos que generan intervienen en procesos de señalizacion celular. En la actualidad no se conocen exactamente los enzimas implicados en la activacion de estas fosfolipasas mediada por oxidantes. En el presente estudio se ha empleado tert-butilhidroperóxido (TBHP) como agente oxidante en hepatocitos de rata y ha tenido como objetivo conocer las vias por las que tiene lugar el acumulo da AA y DAG en celulas tratadas con el oxidante n una situación que precede a la muerte celular. Como objetivos especificos se ha desarrollado: -El estudio de las vias integradas en la cascada de señalización por las que el TBHP induce el cambio en los niveles intracelulares de AA y DAG. El tratamiento de los hepatocitos con distintas moléculas con capacidad antioxidante demostro que los niveles intracelulres de GSH y de ROS inducidos por TBHP tienen un importante papel en el proceso que conduce a la liberación de AA estimulada por el oxidante. De hecho, se encontro una correlacion positiva entre el acúmulo intracelular de AA y los niveles intracelulares de GSH y ROS inducidos por el oxidante. Los niveles intracelulares de DAG se correlacionaron con la formacion intracelular de ROS inducida por el hidro