Microdominios de membrana como plataformas de señalización en la glándula submandibular

Resumen

La glándula submandibular constituye un buen modelo para el estudio del acoplamiento estímulo-respuesta y los mecanismos de señalización celular. En este tejido se expresan diversos tipos de receptores como los adrenérgicos, muscarínicos y purinérgicos. Por otro lado, en los últimos años se ha propuesto que la membrana plasmática de la célula no es una estructura homogénea, sino que existen dominios discretos (rafts) con una composición y características físicas distintas al resto de la membrana. Además, existe una relación entre estos microdominios de membrana y procesos de señalización y tráfico celular. En el presente trabajo se ha caracterizado tanto la respuesta purinérgica al ATP observada en la glándula submandibular, así como el papel de los microdominios de membrana en las rutas de señalización acopladas a distintos receptores expresados en este tipo celular. Mediante la utilización tanto de herramientas farmacológicas como de ratones modificados genéticamente que no expresan un receptor purinérigoc P2X7 funcional, se ha podido caracterizar que este receptor es el principal responsable de la señalización purinérgica observada en respuesta al ATP. Además, este receptor está implicado en algunos aspectos de la secreción salival in vivo. Por otro lado se han aislado y caracterizado microdominios de membrana purificados por dos métodos distritos, con y sin detergente. En ambos casos se puede aislar una fracción de membrana con propiedades análogas a los 'rafts' lipídicos: alto contenido en colesterol, ácidos grasos saturados, vaeolina-1, gangliósidos GM1, así como una mayor rigidez respecto al resto de la membrana. La disgregación de estos dominios bloque efectivamente la movilización de calcio de los depósitos intracelulares de calcio por agonistas muscarínicos, adrenérgicos y peptidérgicos, pero no a la entrada capacitativa de calcio. Por otro lado, el receptor proapoptótico P2X7 se distribuye en dos poblac