Lipidomic studies in native and bacterial toxin-treated mammalian cells

Resumen

El objetivo de esta tesis es el análisis lipidómico de células de mamífero tratadas con ¿-toxina (ATX) de Clostridium perfringes, o con detergentes. La ATX es el principal factor de virulencia en la gangrena gaseosa. Las células GM95 tratadas con ATX desarrollam muerte celular por apoptosis al cabo de pocas horas. La toxina tiene actividad fosfolipasa C y esfingomielinasa, y produce un descenso generalizado en los fosfolipidos celulares y un aumento de las ceramidas, mensajeros de apoptosis. No se observa el esperado aumento en diacilgliceroles, pero si aumentan los triacilgliceroles probablemente derivados de los anteriores. Cuando las células se tratan con la bacteria productora de toxina, los efectos observados son similares, pero de menor magnitud. También se ha estudiado la lipidómica de la fracción resistente a la solubilización por detergente (Triton X-100) de células MDCK. La fracción resistente está muy enriquecida en lípidos saturados, especialmente diacilgliceroles y ceramidas. La tesis se completa con estudios sobre la toxina épsilon de C. perfringes y con datos sobre la solubilización de membranas modelo por detergentes.