Dominios de membrana y resistencia a la solubilización por detergentes

Resumen

Con el fin de poder comprender mejor el fenómeno de los rafts y los efectos producidos por las ceramidas en la membrana celular, realizamos una serie de estudios biofísicos en vesículas modelo. En un principio estudiamos el efecto de la composición lipídica en la resistencia a la solubilización por Triton X-100 las principales causas de esta resistencia. Con este fin se analizaron el efecto del Triton X-100 en vesículas formadas principalmente por PC/SM/Ch. Se observó que es necesaria la presencia de esfingomielina (y no de otros esfingolípidos) y del colesterol para que se produzca una resistencia a la solubilización por Triton X-100 y que esta resistencia era mayor a 37ºC que a 4ºC, disminuyendo según aumentaba la proporción de PC. Este comportamiento no sólo estaba supeditado a la existencia de una fase liquido ordenada, ya que en proporciones similares de lípidos liquido ordenado, la interacción que se produce entre el grupo hidroxi del colesterol y el grupo arbonilo de la SM, incrementa la resistencia ala solubilización por Triton X-100. En las condiciones en las que se producía una solubilización parcial, los residuos no solubilizados presentaba una composición cercana a PC/SM/Ch (1:1:1), con lo cual no se puede estar seguro de que las membranas resistentes a los detergentes correspondan a estructuras preexistentes en la membrana o que sean el resultado de una solubilización parcial y posterior reesamblaje de las bicapas lipídicas. Continuando los experimentos de solubilización se procedió a buscar una mezcla lipídica sencilla que se comportase como los rafts, o sea que fuera resistente a la solubilización a bajas temperaturas, pasando a ser soluble al aumentar la temperatura, esto se consiguió con la muestra SM/Ser. Al observar la composición de los residuos resistentes a la solubilización se observo que están enriquecidos en Cer, además para que ocurriera esta resistencia era necesario un alto empaquetamiento de las c