Alfa-hemolisina de escherichia coliinteracción con eritrocitos y actividad lítica en membranas

Abstract

En la tesis se han abordado distintos aspectos del mecanismo de actuación de la alfa-hemolisina de Escherichia coli (HlyA). En concreto, se ha estudiado la interacción específica de la toxina con membranas de eritrocitos y la implicación de distintas regiones en la actividad de la proteína. Del estudio de la interacción de la toxina con membranas de eritrocitos se concluye que la actividad de la toxina está mediada por la interacción específica de la misma con la glicoforina, que actúa como receptor específico de HlyA en esté tipo celular. Además se define la región entre los aminoácidos 914-936 como implicada en esta interacción específica entre ambas proteínas. Por otra parte, al determinar el papel que desempeñan los triptófanos de HlyA, se observa que los triptófanos no parecen implicados en la capacidad de inserción en membranas. Al mismo tiempo, de la mutagénesis dirigida del triptófano 914 deduce que es el único que participa en el cambio de fluorescencia intrínseca que se observa cuando se produce el cambio conformacional que provoca el calcio en la proteína. Finalmente, se aborda el papel de la histidina 859, que se encuentra en la penúltima de las repeticiones del dominio de unión a calcio, concluyéndose que es un residuo esencial para la actividad de la toxina, afectando a los equilibrios de agregación de la toxina, además de ser responsable de la dependencia con el pH de la actividad de HlyA.