Subdominio helicoidal de dmakcambios conformacionales e implicación en el ciclo funcional

Resumen

La presente Tesis Doctoral se centra en el estudio del subdominio helicoidal C-terminal de la chaperona DnaK, representante mayoritario de las proteínas Hsp70 en E.coli. Este grupo de chaperones moleculares se encuentra ampliamente distribuido en procariotas y en el citosol y orgánulos eucariotas. Participan en un amplio espectro de actividades como son el ensamblaje de complejos proteicos, el transporte a través de membranas, el plegamiento de proteínas sintetizadas de novo, así como en la solubilización de agregados proteicos formados en situaciones de estrés celular. Todo este amplio conjunto de actividades se realiza a través de un mecanismo que implica cambios conformacionales concertados en los dos dominios funcionales de que constan las proteínas Hsp70. Se han estudiado por medio de técnicas biofísicas y bioquímicas el papel de las hélices C-terminales de DnaK en la comunicación alostérica entre ambos dominios de la proteína y en la estabilidad del centro de unión a sustrato. Así mismo, se han identificado las interacciones que posibilitan el anclaje de las hélices C-terminales sobre el centro de unión a sustrato, y que regulan por lo tanto la accesibilidad del mismo. Por último, se ha estudiado la interacción de las cochaperonas GrpE y DnaJ con DnaK, y el papel que desempeña el dominio de unión a sustratos en esta interacción, y sus repercusiones fisiológicas.