Dirección de la carbapenamasa oxa-40 en aislamientos clínicos de pseudomonas aeruginosa resistentes a imipenem y estudio preliminar de su soporte genético

Resumen

Se llevó a cabo el análisis de resistencia antibiótica de los aislamientos clínicos de Pseudomonas aeruginosa recogidos en el Hospital de Santa Marina durante el año 2002. Los resultados mostraron que los agentes antimicrobianos más activos para tratar las infecciones causadas por P. aeruginosa fueron amikacina y meropenem, seguidas de imipenem. Los aislamientos resistentes a imipenem se seleccionaron para un estudio más exhaustivo; entre estos aislamientos se observó un alto grado de multirresistencia antibiótica, lo que parece indicar la presencia simultánea de diferentes mecanismos de resistencia en esos aislamientos. Se realizó un tipado genético para observar la relación clonal de los aislamientos que mostró una gran diversidad genética entre los aislamientos resistentes a imipenem y una persistencia de los clones a lo largo del tiempo. Se analizó la presencia de carbapenemasas como posible mecanismo de la resistencia a imipenem; Los tests fenotípicos que mejores resultados ofrecieron fueron el test de Hodge con SO4Zn para carbapenemasas, y el DDST (test de sinergia de doble disco) para metalo-Beta-lactamasas. Mediante los test genotípicos se detectaron 2 aislamientos que portaban el gen blaoxa-40. Es la primera vez que se describe este gen en P. aeruginosa, gen que se identificó por primera vez en aislamientos clínicos de A. baumannii del mismo hospital, y entre los que se encuentra ampliamente diseminado. Este hecho hizo pensar que este gen podía encontrase en una estructura móvil que podía haber pasado de una especia a otra. La detección de integrotes de clase 1 y su posterior hibridación con sonda específica descartaron su relación con estas estructuras. El análisis plasmídico y los experimentos de digestión enzimática y posterior hibridación con una sonda específica para OXA-40 localizaron esta enzima en un plásmido de tamaño aproximado de 32 kb., presente tanto en P. aeruginosa como en A. baumannii sugiriendo que se pudiera tratar de la misma estructura genética. Esto se ve apoyado por experimentos de digestión enzimática de DNA plasmídico y posterior hibridación con sonda específica en los que se obtiene el mismo perfil de hibridación tanto en los aislamientos de P. aeruginosa como en A. baumannii, así como en el análisis de la secuencia del gen, idéntico en ambos casos.