Embryonic stem cell transplantation into the seminiferous tubulimicrovascularization pattern and angiogenesis in the resulting teratocarcinoma

Resumen

Las neoplasias de la línea germinal masculina representan un grupo de tumores de las gónadas que en el 95% de los casos tiene como origen común el carcinoma in situ del testículo (CIS). Para estudiar los primeros estadios invasivos de esta neoplasia intratubular hemos desarrollado un modelo tumoral que se basa en los parecidos fenotípicos y funcionales de las células madre embrionarias (células ES) con el CIS. Para ello, marcamos una línea e células ES (AB1) transfectándola con el plásmido de la proteína verde fluorescente (GFP). Posteriormente, trasplantamos dichas células al interior de los túbulos seminíferos mediante microinyección. Dejados a su evolución estos trasplantes se transformaron en teratocarcinomas de aspecto histológico similar al de los tumores de las células germinales espontáneos. Al ser la vascularización de gran importancia para la progresión tumoral, decidimos estudiar más en profundidad la arquitectura microvascular presente en los tumores experimentales generados, comparándola después con la del testículo sano. Para ello, empleamos la técnica de los moldes de corrosión mediante perfusión de resinas acrílicas, por ser la que más detalles del sistema vascular revela a nivel morfológico. La densidad vascular de los tumores obtenidos resultó mayor que la del tejido testicular normal y los capilares neoplásicos presentaron diámetros que doblaban los del órgano. Igualmente, se estudió el origen celular del componente endotelial de los vasos neoformados, dándose la circunstancia de que era mixto, es decir, procedían tanto de las células trasplantadas como del huésped. Asimismo, se estudió la reacción del estroma frente a la invasión tumoral. En las muestras histológicas de los tumores se evidenció una gran proliferación de miofibroblastos, responsables de la secreción de colágenos, así como la expresión de gran cantidad de factores relacionados con la vascularización, como son el VEGF, PIGF, VEGF-R1, VEGF-R2 y la metaloproteasa de la matriz MMP-2. Por último, se analizó el efecto de la hipoxia (5%O2) sobre las células trasplantadas y las del propio tumor. En estos ensayos in Vitro empleamos células madre de la línea AB1 y las líneas F9 y P19, procedentes de teratocarcinomas experimentales. En todos los casos, hubo un incremento tanto en la proliferación celular como en la expresión génica de factores angiogénicos.