Caracterización de las acciones protectoras del ácido oleanólico en modelos experimentales de patologías con enfermedad inflamatoria

Resum

Introducción: El sistema inmunológico es la primera barrera de defensa natural del cuerpo frente a agentes patógenos, que consta de una respuesta coordinada y conjunta del sistema inmune innato y adaptativo. Sin embargo, hay veces que pueden ocurrir fallos en su modulación, que se pueden clasificar en: inmunodeficiencias (estado patológico en que el organismo está vulnerable a la infección), autoinmunidad (no discrimina entre lo propio y lo ajeno en el proceso de reconocimiento inmunitario) e hipersensibilidad (respuesta exagerada) [1-6]. La esclerosis múltiple es una enfermedad desmielinizante, adquirida, crónica que afecta de forma específica al sistema nervioso central (SNC) [7-12]. Se encuentra entre las enfermedades autoinmunes más comunes en personas jóvenes entre los 20 y los 40 años de edad, que se caracteriza por el ataque del sistema inmune, mediado por células T, contra antígenos del SNC [10-13]. La formación de la placa desmielinizante es el estadio final de varios procesos patológicos que incluyen: disrupción de la barrera hematoencefálica (BHE), inflamación multifocal, desmielinización, remielinización, pérdida y depleción de oligodendrocitos, gliosis reactiva y degeneración axonal y neuronal [14,15], que dan lugar a un aumento en la discapacidad neurológica [12, 13, 16, 17]. La miocarditis es una enfermedad autoinmune inflamatoria del corazón y una de las principales causas de la insuficiencia cardiaca en pacientes menores de 40 años o atletas jóvenes. Se caracteriza por la infiltración de células en el miocardio que conlleva a la necrosis, pérdida de miocitos, apoptosis y fibrosis [18, 19]. La miocarditis puede dar lugar a muerte súbita, y un 12% de los pacientes desarrollan miocardiopatía dilatada con disfunción contráctil del ventrículo izquierdo [19-21]. La conjuntivitis alérgica es una enfermedad de hipersensibilidad a agentes inocuos, siendo la enfermedad ocular más común [22, 23]. La conjuntivitis alérgica estacional y perenne son las formas más comunes, producidas por la inflamación alérgica de la superficie ocular que se caracteriza por sus recurrencias [1,2]. El inicio de la enfermedad suele ser brusco, bilateral, con gran sintomatología: picor, escozor, sensación de cuerpo extraño, fotofobia, lagrimeo y rinorrea [3, 4]. El ácido oleanólico (AO) es un triterpeno pentacíclico que se encuentra en numerosas plantas entre las cuales destacamos el olivo. Es un componente natural presente en la dieta mediterránea con numerosas propiedades: cardioprotectoras [24-26] anti-oxidantes [26-29], anti-inflamatorias [25, 26, 30, 31], anti-cancerígenas [32-35], hepatoprotectoras [24, 26, 29, 36-38]. etc. El objetivo general de este trabajo es el estudio del efecto del ácido oleanólico en diferentes modelos animales de enfermedades inflamatorias y/o con alteraciones que afectan a la respuesta inmune como: la esclerosis múltiple, la miocarditis y la conjuntivitis alérgica. Contenido de la investigación: Para caracterizar el potencial terapéutico del ácido oleanólico en la esclerosis múltiple, se realizaron estudios en un modelo animal experimental de esclerosis múltiple, la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE). Se caracterizaron las propiedades neuroprotectoras y anti-oxidantes del ácido oleanólico mediante el análisis de: parámetros microscópicos (infiltración celular, desmielinización, muerte celular, degeneración neuronal) en distintos tejidos del SNC (cerebelo, medula espinal y nervio óptico). Se evaluó la respuesta inflamatoria (citoquinas pro-inflamatorias y anti-inflamatorias) e inmune (auto-anticuerpos y capacidad de proliferación de los linfocitos), el estrés oxidativo (anión superóxido, peróxido de hidrógeno, peroxidación lipidica, AOPP, SOD, Cat, FRAP) y los niveles de glutamato en tejido. Por último se analizaron in vitro las acciones directas del AO sobre células ganglionares de retina en el estrés oxidativo y la muerte celular. Los resultados de nuestros estudios in vivo e in vitro han demostrado la eficacia del AO en la prevención de la EAE como se evidencia por la reducción de la producción de diferentes mediadores (citoquinas pro-inflamatorias, ROS), la inhibición de la producción de auto-anticuerpos y la disminución del infiltrado inflamatorio que puede llevar a la muerte celular. En el presente estudio el tratamiento con AO no solo redujo todos estos parámetros característicos en EM retrasando la aparición de los síntomas motores y ejerciendo un cambio en la respuesta inflamatoria sino que también protegió de la neurodegeneración. Por lo tanto, este estudio proporciona información útil para la posible aplicación del AO en el tratamiento de pacientes que sufren de esclerosis múltiple. En el estudio del potencial profiláctico y terapéutico del ácido oleanólico en la miocarditis se utilizó un modelo animal: la miocarditis autoinmune experimental (MAE). Para ello se evaluaron parámetros macroscópicos (índice peso corazón/peso corporal) y microscópicos (infiltrado celular, fibrosis, depósitos de calcio). Se analizó la respuesta inflamatoria (citoquinas pro-inflamatorias y anti-inflamatorias) e inmune (auto-anticuerpos y capacidad de los linfocitos de producir citoquinas y su proliferación) y por último se analizó in vitro la influencia del AO en células relevantes del remodelado cardiaco: cardiomiocitos y cardiofibroblastos. Los resultados de nuestros estudios in vivo e in vitro han demostrado la eficacia del AO en la prevención de la MAE como se evidencia por la reducción en la severidad de la inflamación, de la fibrosis y de la calcificación del miocardio. Los efectos beneficiosos pueden asociarse con la inhibición de la producción de auto-anticuerpos, la secreción de citoquinas pro-inflamatorias/profibróticas, y posiblemente con la estimulación de poblaciones específicas de células T a través de la producción de proteínas inmunorreguladoras que amortiguan la autoinmunidad. Por lo tanto, este estudio proporciona información útil para la posible aplicación del AO para el tratamiento de pacientes que sufren de miocarditis. Para estudiar el potencial terapéutico del ácido oleanólico en la conjuntivitis alérgica, se realizó en estudio en un modelo animal que se asemeja a la enfermedad humana, la conjuntivitis autoinmune experimental (CAE). Se evaluaron parámetros microscópicos (infiltración celular), la respuesta inflamatoria (citoquinas pro-inflamatorias y anti-inflamatorias) e inmune (auto-anticuerpos y capacidad de proliferación de los linfocitos). Por último, en células relevantes en procesos alérgicos, mastocitos y eosinofilos, se analizó la influencia del AO en la migración y diferenciación celular. Los resultados de nuestros estudios in vivo e in vitro han demostrado la eficacia del AO en el tratamiento de la CAE como se evidencia por la reducción en la severidad de la inflamación. Los efectos beneficiosos pueden asociarse con la inhibición de la producción de IgE, de la degranulación de los mastocitos, de la secreción de citoquinas pro-inflamatorias y quimiocinas, y posiblemente con la inhibición de la migración de eosinófilos y mastocitos a los focos de inflamación y de la diferenciación de eosinófilos que amortiguan la alergia. Por lo tanto, este estudio proporciona información útil para la posible aplicación de AO para el tratamiento de pacientes que sufren desórdenes alérgicos oculares. Otros estudios deben ser realizados para explorar su actividad cuando es administrado por vía tópica. Conclusión: El ácido oleanólico ejerce un efecto protector en enfermedades inflamatorias y autoinmunes actuando como anti-inflamatorio y anti-oxidante, como regulando la producción de citoquinas pro-inflamatorias y anti-inflamatorias. Bibliografía: 1. Portou, M.J., et al., The innate immune system, toll-like receptors and dermal wound healing: A review. Vascular Pharmacology. 2. Fausto, K.A., Robins & Cotran Patologia - Bases patológicas das doenças, ed. 7th. 1999: ELSEVIER. 3. Smeltzer;, S.C., et al., BRUNNER & SUDDARTH'S TEXTBOOK OF MEDICAL-SURGICAL NURSING, ed. 11. Vol. 2. 2009: Editora Guanabara Koogan S. A. 4. Green, M.S.N.M., MEDICAL-SURGICAL NURSING Health and Illness Perspectives, ed. th. 2007, Loures: LUSODIDACTA. 5. Miyagawa, F., et al., The use of mouse models to better understand mechanisms of autoimmunity and tolerance. Journal of Autoimmunity, 2010. 35(3): p. 192-198. 6. Cunha-Neto, E., et al., Autoimmunity. Adv Parasitol, 2011. 76: p. 129-52. 7. 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