Estudio de la proliferación celular y proteínas asociadas en tumores cerebrales humanos

Résumé

Los tumores cerebrales son procesos proliferativos incontrolados. En las células que conformaban los tejidos los mecanismos moleculares encargados de regular la división y muerte celular pueden experimentar diversas alteraciones dando lugar a la formación de un proceso neoplásico. El estudio del desequilibrio entre la proliferación y muerte celular en tumores cerebrales resulta de sumo interés en cuanto a que aporta una información sobre la velocidad con la que la masa tumoral está creciendo. Este dato puede ayudar en el diagnóstico y pronóstico de la enfermedad, e incluso orientar las pautas terapeúticas a instaurar en base a la cinética celular. Así mismo, la identificación de las alteraciones en la expresión de ciertas proteínas implicadas en la regulación del ciclo celular, como la proteína supresora tumoral p53 y la oncoproteína p21-ras, pueden aportar un mejor conocimiento sobre la genésis y el desarrollo de dichos procesos. Por todo ello, el presente trabajo se ha centrado en la valoración de la proliferación y pérdida celular por apoptosis y la expresión de proteínas asociadas al ciclo en tumores cerebrales humanos. Con este propósito se empleó un conjunto de 177 muestras tumorales de diferente estirpe y grado de malignidad. Para la valoración de la proliferación celular se llevó a cabo un estudio comparativo entre diferentes métodos empleados actualmente. Se realizó una valoración del contenido en ADN por citometría de flujo, detección de PCNA y Ki-67 e incorporación de 5'-Bromo-2'- deoxiuridina (BrdU) en células tumorales "in vitro". La identificación de la apoptóis se realizó mediante la detección de radicales 3'-OH en los fragmentos de ADN y para la caracterización de la expresión de p53 y p21-ras se emplearon anticuerpos monoclonales específicos. Los datos obtenidos fueron relacionados con el tipo histológico y la supervivencia de los paciente