Desarrollo de métodos moleculares para el diagnóstico de las piroplasmosis y su aplicación al estudio de la infección en sistemas de ganadería semi-extensiva

Zusammenfassung

Las piroplasmosis son enfermedades causadas por hemoprotozoos transmitidos al ganado doméstico através de las garrapatas. El impacto económico de estas enfermedades está asociado a las pérdidas por lamuerte de los animales o por los costes derivados de su prevención y/o tratamiento.Para llevar a cabo un control efectivo de las piroplasmosis es necesario contar con técnicas dediagnóstico eficaces, con una sensibilidad y especificidad altas, que permitan la detección eidentificación de las especies responsables de causar enfermedad. De igual modo, un buen control de laspiroplasmosis exige un conocimiento exhaustivo de la situación epidemiológica de estas enfermedadesen cada zona o explotación.Los objetivos de esta Tesis Doctoral pretenden mejorar el conocimiento epidemiológico de laspiroplasmosis en tres zonas bioclimática y geográficamente diferentes como son la ComunidadAutónoma Vasca, Menorca y Túnez. Durante este trabajo se han utilizado tres técnicas de diagnósticomolecular diferentes. Dos técnicas han sido desarrolladas durante este trabajo, una PCR a Tiempo-Real(qPCR) y un array en suspensión basado en la tecnología Luminex®. La qPCR desarrollada aquí hapermitido la detección y cuantificación de Theileria annulata, agente responsable de provocar latheileriosis mediterránea y tropical en el ganado vacuno sobre todo en regiones templadas y tropicales.Así mismo, el array en suspensión, una técnica con una alta capacidad multiplex, ha permitido ladetección e identificación simultánea de las distintas especies de piroplasmas presentes en el ganadodoméstico o en garrapatas. Estas dos técnicas han sido utilizadas conjuntamente junto con la RLB(Reverse Line Blotting), técnica de diagnóstico multiplex para las piroplasmosis.Una vez que las técnicas fueron desarrolladas y puestas a punto se utilizaron para evaluar la incidencia yla dinámica de la infección por piroplasmas en las tres zonas de estudio ya mencionadas. Así mismo, sevaloró el efecto de diversos factores como la especie animal, la edad, la época de muestreo, la presenciade garrapatas, el tipo de manejo y explotación en la infección por piroplasmas.Estos estudios han permitido establecer una situación epidemiológica de equilibrio endémico en laszonas de estudio y han permitido valorar el efecto de diferentes factores como la edad de los animales yel sistema de manejo en la epidemiología de las piroplasmosis, lo que es de vital importancia a la horade establecer unas medidas de control eficaces.