Señalización intracelular inducida por el agente antitumoral doxorrubicina en cultivos primarios de hepatocitos de rata

Résumé

Los radicales libres y, en general, las especies reactivas oxigenadas (ROS) causan lesiones en el DNA, lípidos y proteínas, induciendo una situación de estrés oxidativo, asociada a numerosas patologías. Sin embargo, a concentraciones pequeñas actúan como mensajeros intracelulares, capaces de desencadenar cascadas de señalización que conducen a la activación de enzimas y de factores de transcripción, alterando finalmente la expresión genética y mediando respuestas celulares de adaptación o de muerte celular. La presente Tesis Doctoral propone elucidar los mecanismos de señalización dirigidos por el agente antitumoral doxorrubicina (dox) en cultivos primarios de hepatocitos, las respuestas que provoca a largo plazo, así como establecer la implicación de especies radicalarias en dichas respuestas. Como resultado de este trabajo se concluye que la Dox induce señalización intracelular sin provocar estrés oxidativo ni citotoxidaid, activando las vías de las MAPKs ERL, p38 y JNK depende de la generación de ROS, en particular de anión superóxido, siendo p38 activada por mecanismos independientes de ROS. La Dox provoca la movilización de NF-kB que depende de la generación de anión superóxido y que cursa de una forma atípica (tanto pro su cinética como por su persistencia), no viéndose acompañada de aumento de la actividad transcripcional, sino más bien de un comportamiento represor sobre los genes con secuencias -kB en sus promotores. En la vía de movilización de NF-kB no participa ninguna de las MAPKs analizadas, pero sí alguna de las isoformas de PKC, siendo su activación dependiente de anión superóxido. Finalmente resaltar que la DOX conduce a una muerte celular por apoptosis dependiente de caspasas y de anión superóxido.