Desarrollo de micro y nanopartículas poliméricas para la administración de vacunas por distintas vías mucosas

Résumé

La microencapsulación de péptidos antigénicos representa una ventaja competitiva frente al uso de los mismos antígenos adminstrados en forma libre por vías parenterales y mucosas. En la presente memoria experimental se ha opitmizado el método de elaboración de partículas de PLGA nanométricas ( de 200 nm y 500 nm) y se ha realizado un estudio comparativo de las características in vitro de las partículas obtenidas frente a las partículas de PLGA de 1 um. Los resultados demuestran que las partículas más pequeñas originan menores rendimientos de encapsulación, aunque estos nunca son menores del 65%. No obstante, no se observan diferencias significativas en las características in vitro de las partículas de diferentes tamaños obtenidas, puesto que los perfiles de liberación y los potenciales zeta de las mismas son equivalentes para todo el rango de tamaños estudiado. Además, la BSA permanece en todos los casos estable frente al proceso de encapsulación (tal y como se ha determinado mediante la técnica de SDS-PAGE) y se encuentra en forma de dispersión sólida en el interior de la matriz polimérica de PLGA, sin establecer interacciones significativas con el polímero que la encapsula (determinado por Calorimetría Diferencial de Barrido). Una vez caracterizadas las partículas in vitro se procedió a determinar sus propiedades inmunogénicas. Los resultados obtenidos por las vías subcutánea, oral e intranasal demuestran que la administración de partículas de 1 um de PLGA cargadas con BSA originan respuestas sistémicas de IgG significativamente superiores que las que se obtienen con partículas nanométricas o con el antígeno libre. Asimismo, todas las formulaciones de partículas estimulan la formación de una respuesta combinada de IgG2a e IgG1, cuya ratio es significativamente superior al que se obtiene con la administración del antígeno libre, o del antígeno adsorbido al Hidróxido de Aluminio. Todas las f