Función de las proteínas de la familia de trag en la conjugación bacteriana. Caracterización de trwb de r388

Resumo

EL PRESENTE TRABAJO NOS HA PROPORCIONADO DATOS SUFICIENTES PARA DETERMINAR QUE TRWB Y EL RESTO DE PROTEINAS PERTENECIENTES A ESTA FAMILIA REALIZAN UN PAPEL ESENCIAL EN LA TRANSFERENCIA CONJUGATIVA DEL DNA, A TRAVES DE SU INTERACCION CON EL RELAXOSOMA Y CON LA ESTRUCTURA DEL SISTEMA DE TRANSPORTE, ACOPLANDO AMBOS COMPONENTES. A ESTE RESPECTO, LA DEMOSTRACION DE SU ACTIVIDAD DE UNION A TRWA O AL ORIT EN PRESENCIA DE ESTA PROTEINA, NOS PROPORCIONAN UNA EVIDENCIA DIRECTA DE LA INTERACCION DE ESTA PROTEINA ACOPLADORA CON EL RELAXOSOMA. SIN EMBARGO, LA NATURALEZA DE LAS CONEXIONES A TRAVES DE LAS CUALES OCURRE EL POSTERIOR TRANSPORTE DEL DNA DURANTE LA CONJUGACION Y LA IDENTIDAD DEL RESTO DE LOS COMPONENTES QUE PODRIAN PARTICIPAR EN EL MISMO SON AUN DESCONOCIDOS. PENSAMOS QUE TRWB JUEGA UN IMPORTANTE PAPEL EN ESTE PROCESO A TRAVES DE LA OBTENCION DE ENERGIA POR HIDROLISIS DE NTPS Y AUNQUE NO HAYAMOS PODIDO COMPROBAR POR MUTAGENESIS DIRIGIDA QUE ESTA ACTIVIDAD ES ESENCIAL EN EL PROCESO CONJUGATIVO. ESTE HECHO PODRIA DEBERSE A QUE EN CONDICIONES FISIOLOGICAS, TRWB NO PUEDE SER ACTIVA PERMANENTEMENTE Y QUIZAS SOLO LO SEAN EN LA TRANSFERENCIA DEL DNA CUANDO SE NECESITE UN APORTE EXTRA DE ENERGIA A TRAVES DE LA INTERACCION CON ALGUN OTRO COMPONENTE DEL SISTEMA DE CONJUGACION. PUESTO QUE LA PROTEINA TRWBAN70 PUEDE SER FACILMENTE PURIFICADA SEGUN EL PROTOCOLO ESTABLECIDO Y NO NECESITA LA PRESENCIA DE DETERGENTES EN LOS MEDIOS DE ENSAYO IN VITRO, LA BUSQUEDA DE COMPONENTES CON LOS QUE PUEDE INTERACCIONAR ESTA PROTEINA RESULTA MUCHO MAS SENCILLA. PENSAMOS QUE FUTUROS EXPERIMENTOS ENFOCADOS A LA BUSQUEDA DE POSIBLES MODULADORES, COMPONENTES DEL SISTEMA DE CONJUGACION CON LOS QUE INTERACCIONA TRWB, NOS PERMITIRA RECONSTITUIR LAS CONDICIONES FISIOLOGICAS EN LAS QUE TIENE LUGAR LA ACTIVIDAD DE LA PROTEINA.